Бокс неподвижного воздуха

Простая зона стерильной работы без активного потока воздуха. Подходит для агара, LC и небольших переносов при аккуратной технике.

Назначение

Самый доступный инструмент для создания зоны стерильной работы в домашних условиях. Принцип действия основан на том, что в неподвижном воздухе частицы пыли и споры оседают на поверхности, а не витают в объёме. Бокс ограничивает рабочее пространство и даёт воздуху успокоиться, после чего внутри можно выполнять операции с низким риском контаминации.

Основные сценарии:

• Перенос агара (agar-to-agar, clone-to-agar).
• Инокуляция зерна агаром или жидкой культурой.
• Пересев жидкой культуры (LC expansion).
• Grain-to-grain transfer при отсутствии ламинарного шкафа.

Не подходит для операций, требующих длительного открытого контакта (например, массовая фасовка в открытые пакеты), так как отсутствует активная защита от оседающих частиц.

Виды

• Классический SAB (Still Air Box) — прозрачный пластиковый контейнер с двумя отверстиями для рук. Отверстия вырезаются без дополнительных уплотнений. Самый простой и распространённый вариант.
• Модифицированный SAB с нарукавниками — в отверстия вклеиваются эластичные манжеты или длинные перчатки, чтобы минимизировать движение воздуха при работе. Удобнее, но сложнее в изготовлении.
• SAB на основе аквариума / перевёрнутого контейнера — бокс ставится вверх дном, а руки заводятся снизу. Вариант для тех, кому неудобно работать через боковые отверстия.
• Glove box — герметичный бокс со встроенными перчатками. В отличие от SAB, полностью изолирован, но движения рук создают перепады давления и турбулентность, что может поднимать осевшие частицы.

Изготовление своими руками

Оптимальный материал — прозрачный полипропилен (PP) или поликарбонат. Подойдёт пластиковый контейнер объёмом 60–120 литров.

1. Вырезать два отверстия диаметром 120–150 мм на передней или боковых стенках. Расстояние между центрами отверстий — 25–30 см (по ширине плеч).
2. Края отверстий оплавить или зачистить наждачной бумагой, чтобы не цеплять перчатки.
3. По желанию наклеить на края отверстий уплотнитель (мягкий ПВХ-профиль, разрезанный садовый шланг).
4. Крышка должна плотно закрываться, но не герметично — важно, чтобы при введении рук не создавалось значительного перепада давления.

Готовые SAB продаются, но самостоятельное изготовление занимает 15–30 минут и обходится в 5–10 раз дешевле.

Техника работы в SAB

1. Подготовка. Протереть все внутренние поверхности 70% изопропиловым спиртом или 3% перекисью водорода. Протереть все предметы, которые будут внесены в бокс.
2. Загрузка. Поместить внутрь всё необходимое: чашки Петри, банки с зерном, шприцы, скальпель, спиртовку или горелку. Не открывать стерильную тару до успокоения воздуха.
3. Успокоение воздуха. После загрузки закрыть бокс и выждать минимум 5–10 минут. За это время взвешенные частицы осядут на дно и стенки.
4. Работа. Движения медленные, без рывков. Руки не вынимать без крайней необходимости — каждое извлечение и возврат руки поднимает осевшие частицы.
5. Стерилизация инструментов. Скальпель, петлю, пинцет стерилизовать пламенем спиртовки внутри бокса. Спиртовка также создаёт локальный восходящий поток, дополнительно защищающий рабочую зону.
6. Завершение. После окончания работы все инструменты извлечь, поверхности снова протереть спиртом.

Ограничения и особенности

• SAB не фильтрует воздух — он лишь даёт частицам осесть. При сквозняках, работающем кондиционере или открытых окнах эффективность резко падает.
• Работа в SAB требует больше времени и аккуратности по сравнению с ламинарным шкафом.
• Не подходит для работы с большими объёмами (например, фасовка десятков пакетов) — слишком мало пространства и нет активной защиты.
• При правильной технике контаминация не превышает 2–5%, что сопоставимо с недорогими ламинарными шкафами.

Рекомендации

• Располагать бокс в помещении без сквозняков — закрыть окна, выключить вентиляторы, кондиционеры.
• Перед работой принять душ, надеть чистую одежду, маску и шапочку — основным источником контаминации является сам оператор.
• Использовать подставку или решётку внутри бокса, чтобы руки и инструменты не лежали на дне, где скапливается основная масса осевших частиц.
• Держать спиртовку подальше от пластиковых стенок — полипропилен плавится при ~160 °C.
• Если в помещении высокая влажность (>70%), перед работой протереть бокс изнутри сухой салфеткой — на влажных поверхностях споры прилипают, а не оседают инертно.
• Для дополнительной защиты можно опрыскать внутренние стенки 3% перекисью водорода из мелкодисперсного распылителя — оседающий туман связывает взвешенные частицы.